Cymhwysiad Datblygu Ffrwyth Gene Gun

Ffrwythau yw ceirios sy'n gymharol ddibynnol ar yr hinsawdd. Yn ystod datblygiad ffrwythau, rheolir ei aeddfedrwydd gan asid abscisic (ABA).

Yn yr astudiaeth hon, defnyddiwyd dull tawelu genynnau a achoswyd gan feirws (VIGS) a dull bomio gronynnau i nodi pedwar amgodiad cDNAs 8'-hydroxylase (ensym allweddol ar gyfer catabolism ocsidiol ABA) mewn ffrwythau ceirios melys. Asid deoxyriboniwcleig) Paccyp707a1-a4

Mae Paccyp707a2 yn rheoleiddio aeddfedu ffrwythau ceirios yn negyddol, ac mae paccyp707a1 yn cyfryngu goddefgarwch sychder

Mae tawelu genynnau a achosir gan feirws (VIGS) yn cyfeirio at y firws sy'n heintio planhigyn genyn targed, a all ysgogi tawelu genynnau endogenaidd, achosi newidiadau ffenotypig, ac yna astudio swyddogaeth y genyn targed yn seiliedig ar amrywiad ffenotypig.

Ffigur 1. Newidiadau mewn biosynthesis ABA (pacnced1), catabolaeth ABA (paccyp707as) a genynnau sy'n gysylltiedig â chynnwys ABA yn ystod datblygu aeddfedu ffrwythau ceirios melys. (a) Lefelau trawsgrifiad absoliwt pedwar pacyp707as yn ystod datblygiad ffrwythau. (b) Lefelau trawsgrifiad cymharol a gronnwyd gan pcnced1 a aba yn ystod datblygiad. Defnyddiwyd Actin fel rheolaeth fewnol a chafodd ei fynegiad ei ganfod gan qrt-pcr.

Mynegi genyn pAccyp707a mewn adwaith dadhydradu

Rhannwyd y ffrwythau a gasglwyd o 32 diwrnod yn ddau grŵp, ac roedd y gyfradd colli dŵr yn 16% ar 45% o leithder cymharol ar ôl ei storio am 3 diwrnod o dan amodau lleithder cymharol isel (45%) a lleithder cymharol uchel (100%). Roedd cynnwys ABA a lefel trawsgrifio pNCED1 mewn ffrwythau yn sylweddol uwch na'r rhai yn y grŵp rheoli. Mae'n rheoli (Ffigur 2). Mewn gwrthgyferbyniad, roedd mynegiant Paccyp707a1 wedi'i ostwng yn sylweddol ar ôl dadhydradu, ac roedd mynegiant Paccyp707a3 hefyd wedi'i reoleiddio'n is, er i raddau llai, ac ni effeithiwyd ar fynegiad Paccyp707a4 a Paccyp707a2 gan ddadhydradu (Ffig. 2). Digwyddodd y newid mwyaf arwyddocaol yn y mynegiant o paccyp707a1, a allai fod yn aelod o brif deulu genyn paccyp707a sy'n ymateb i sychder yn ystod aeddfedrwydd ffrwythau.

Mae tawelu genynnau Paccyp707A2 yn hyrwyddo lliwio ffrwythau ac aeddfedu

Cafodd ffenoteip y ffrwythau ei drin gan Paccyp707A1 / 2-RNAi. Ar yr 28ain diwrnod ar ôl blodeuo, dewiswyd 90 o ffrwythau o dri choed ceirios a blannwyd mewn perllannau ar wahân, a'u rhannu'n dri grŵp o 30 yr un ar gyfer arbrofion tawelu genynnau a achoswyd gan feirws.

Cafodd Paccyp707a1-rnai, paccyp707a2-rnai a'r fector trv rheoli (heb gyp707a genyn) eu chwistrellu i bediclau ffrwyth grwpiau 1, 2 a 3, yn y drefn honno.

Gwerthuswyd y ffrwythau 7 diwrnod ar ôl eu brechu.

(a) trin ffrwythau (ch) 28 diwrnod ar ôl blodeuo;

(b) 43d i drin y ffrwythau;

(c) triniaeth fector 43d trv o ffrwythau (dim genyn cyp707a);

(ch) 43 d o pacyp707a1 ffrwythau a driniwyd gan RNAi;

(d) paccyp707a2 triniaeth ffrwythau RNAi;

(f) Paccyp707a2 Roedd RNAi yn trin ffrwythau 6 diwrnod ar ôl y driniaeth (rheolaeth gywir);

(g) paccyp707a1 RNAi 6 diwrnod ar ôl triniaeth ffrwythau (rheoli ffrwythau ar y dde).