Homogenizer Ultrasonic

Cwestiynau cyffredin ynglŷn â chelloedd torri http://www.scientzbio.com/

Beth yw'r amodau ar gyfer sonication Streptomyces (actinomycetes)?

Dadansoddol: mae actinomycetes yn perthyn i'r ganran molar (G + C) (mol%) o'r grŵp canghennog Gram-positif (Eubacteria) ar goed ffylogenetig y system procariotig, sydd â'r nodweddion moleciwlaidd a biolegol unigryw i brotariotau. Fodd bynnag, yn ei grwpiau gwahanol, mae cyfansoddiad cemegol y wal gell yn amrywio'n fawr.

Yn uwchsain E. coli, defnyddir 400W, ac mae'r dull o dorri 5s am 5s yn effeithiol, ond fe'i defnyddir ar Streptomyces, ac nid oes ganddo unrhyw effaith oherwydd y gwahaniaeth yn y cyfansoddiad wal gell. Yn gyffredinol, caiff y driniaeth cyn-nyddu Streptomyces (actinomycetes) ei ffurfweddu i grynodiad penodol o ataliad bacteriol. Yr amodau penodol ar gyfer y mochyn gan ddefnyddio'r disruptor celloedd ultrasonic yw: casglu'r bacteria yn yr ateb diwylliant 24 hil ar 5 000 r / min am 5 munud i gasglu'r celloedd; golchi gyda phH 7.5 Na2HPO -NaH2PO 3 gwaith, ac yna Lluniwyd y celloedd i mewn i ataliad bacteriol 1: 3 gan ddefnyddio'r clustog. Wedi'i osod mewn tiwb prawf plastig mawr 40 ml; rhowch y tiwb prawf plastig mawr mewn bath iâ a'i leddfu ag amrydd celloedd ultrasonic (pŵer 200W, 1/2 "chwiliad, crush am 30au, 30 troosog); datrysiad mân 12,000 r / min Centrifuge ar gyflymder uchel am 30 min, casglu sbwriel celloedd a sarrennydd. Gall golchi celloedd hefyd gael eu golchi unwaith gyda saline wedi'i oeri cyn neu Tris-HCl yn pH 8. Yn ogystal, mae'r dos ultrasonic yn amrywio'n fawr gyda faint o sampl a bacteria. Gall y pŵer fod yn 400- 600w, wedi'i falu am 5s, ei stopio am 5, bath iâ, a chodir crynodiad terfynol PMSF 1 mM. Er mwyn pennu'r dwysedd ac amlder uwchsain priodol, mae angen gwirio a yw'r bacteria yn cael ei dorri'n llwyr ar unrhyw adeg.