5L Dilyniant Parhaus Thermostatig Ultrasonic Homogenizer Sonicator

Cymhwyso Sonicator Homogenizer Ultrasonic yn Streptomyces

C: Beth yw'r amodau ar gyfer Streptomyces ultrasonication?

A: Yn gyffredinol, caiff cyn-driniaeth ei ffurfweddu fel crynodiad o ataliad bacteriol. Perfformiwyd ymyrraeth ultrasonic gan ddefnyddio pulverizer celloedd ultrasonic. Mae'r amodau penodol a fabwysiadwyd ar hyn o bryd fel a ganlyn:

1. Canolbwyntiwyd cyfrwng diwylliant 24 h bacteriol yn 5 000 r / min am 5 munud i gasglu'r celloedd.

2. Golchwch 3 gwaith gyda thosffer Na2HPO-NaH2PO pH 7.5, ac yna cymysgwch y bacteria i mewn i 1: 3 atal gyda'r byffer hwn. Wedi'i osod mewn tiwb prawf plastig mawr 40 ml.

3. Rhowch y tiwb prawf plastig mawr mewn bath iâ a defnyddiwch chwistrelliad ultrasonic (pŵer 200 W, 1/2 ", crush am 30 s, rhithiol 30 S).

4. Cafodd yr hylif wedi'i falu ei ganrifbwyntio ar 12 000 r / min am 30 munud ar gyflymder uchel i gasglu sbwriel celloedd a seddiant. Yn y bôn, roedd y weithdrefn aflonyddu ultrasonic yr un peth ag yr uchod, hynny yw, gall y celloedd golchi hefyd gael eu hanafu ymlaen llaw fel saline ffisiolegol neu pH 8 Tris. -HCl, golchwch unwaith. Yn ogystal, mae'r dos ultrasonic yn amrywio'n fawr gyda maint y sampl a'r bacteria. Gall y pŵer gyrraedd 400-600w, mwy na 5, stopio 5s, bath iâ, ac ychwanegu PMSF gyda chrynodiad terfynol o 1 mM. Er mwyn pennu'r dwysedd ac amlder uwchsain priodol, mae angen arsylwi ar yr archwiliad microsgopig ar unrhyw adeg i weld a yw'r celloedd wedi'u torri'n llwyr. Mae Actinomycetes yn perthyn i'r genws o facteria Gram-positif gyda chanran molar uchel (G + C) (môl%) ar goed ffylogenetig systemau prokariotig. Wrth wneud uwchsain E. coli, defnyddir y pulverizer cell ultrasonic 400W, ac mae'r dull o 5 stop 5 yn dda, ond ymddengys nad oes unrhyw effaith ar Streptomyces. A fydd hyn oherwydd gwahaniaethau mewn cyfansoddiad wal gell, oherwydd mae E. coli yn facteriari Gram-negyddol.

Llun Proudct